dna粗提取的实验目的?
一、dna粗提取的实验目的?
目的主要是证明DNA是主要的遗传物质。那么DNA是什么样的物质呢?
通过试验,我们知道选用鸡血细胞液作为实验材料。在制备鸡血细胞液时,所用的柠檬酸钠有防止血液凝固的作用。制备过程中,一定要用刚宰杀的鸡的新鲜血,并且要与抗凝剂充分混合,防止凝血。采用静置一天的方法,获得鸡血细胞液。在动手做实验之前先要明确几个需要注意的问题。
1、要严格按照实验指导的方法步骤去操作。
2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,使用时玻璃棒不要碰到烧杯底,在不同的步骤中玻璃棒的用法不同,每一步的用法参照黑板上的指导去操作。
3、在DNA的鉴定中,所用的二苯胺是一种有毒性的试剂,大家在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位,也不要近距离观察。
下面在实验进行过程中,要思考每一操作步骤要达到什么目的。
在进行步骤1时,利用搅拌的5分钟,做如下提问:
为什么要加蒸馏水?加入蒸馏水后细胞将会怎样?
(让细胞内溶液的浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至胀破)
为什么要用力搅拌?
(可以加速血细胞和细胞核的破裂)
所以下一步骤过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质。
在进行步骤3时,要向全班明确:这一步骤是这个实验成败的关键,注意加蒸馏水的方法和使用玻璃棒的方法,千万不能太快太猛,防止打碎DNA。观察滤取出来的黏稠物的颜色。提取的黏稠物较少,原因可能是在溶解DNA时不充分,也可能是析出黏稠物时搅拌的快了。
二、dna的提取与鉴定实验步骤?
一、DNA的提取
实验材料:新鲜鸡血、准备好实验所帮的用具和试剂
1、制备鸡血细胞液
2、提取鸡血细胞的细胞核物质
3、溶解细胞核内的DNA
4、析出含DNA的粘稠物
5、将DNA的粘稠物再溶解
6、过滤含有DNA的氯化钠溶液
7、提取含杂质较少的DNA
二、DNA的监定
1、取两支10mL试管,各加入2moⅠ/L的氯化钠溶液2mL,
2、将丝状物放入其中的一个试管中用玻璃棒搅拌使其溶解
3、向两支试管中各加入4m乚的二笨胺试剂,混合均匀。
4、将试管放到沸水中加热5mim,待试管冷却后,观察并比较厂内支试管中溶液颜变化
三、dna的粗提取与鉴定需要配制什么试剂?
高中教材,粗提取:2M的NaCl溶液,95%酒精 从动物细胞中提取鉴定:二苯胺试剂(如下)A液:1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中,再加1.5ml浓硫酸,用棕色瓶保存.如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化再使用.B液:乙醛的体积分数为0.2%的溶液配制:0.1ml B液加入到10ml A液中,现配现用.
四、dna粗提取的原理?
DNA粗提取的原理是利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,分离出DNA。DNA是一种重要的遗传物质,在细胞中含量丰富,但它在细胞中的分布不均,所以需要从细胞中提取出来,以便进行相关实验。
在DNA粗提取过程中,需要选择适当的材料,并进行预处理,以保证后续提取过程的顺利进行。常用的材料包括动物细胞、植物细胞、细菌、病毒等。
在提取过程中,需要利用洗涤剂、酸碱剂、醇类溶剂等化学试剂来破坏细胞壁和细胞膜,去除蛋白质和脂质等杂质,最终得到含有DNA的溶液。
常用的提取方法包括酚氯仿提取法、离子交换柱提取法、硅胶柱提取法等。这些方法可以根据实验需求进行选择和调整,以达到最佳的提取效果。
五、菜花dna提取实验……请教?
几种新材料的DNA粗提取与鉴定介绍
3.1新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)DNA粗提取与鉴定
一.材料用具
新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。
塑料烧杯,量筒,玻璃棒,尼龙纱布,陶瓷研钵,试管,试管架,试管夹,漏斗,酒精灯,石棉网,三角架,火柴,刀片,天平。
研磨液,体积分数为95%的酒精溶液,二苯胺试剂,蒸馏水。
二.方法步骤
(1)DNA的粗提取
①准备材料 将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24 h。
②取材 称取30 g菜花,去梗取花,切碎。
③研磨 将碎菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min 。
④过滤 在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1 000r/min的旋转频率,离心25 min,取上清液放入烧杯中)。在4S冰箱中放置几分后,再取上清液。
⑤加冷酒精 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中,并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。
(2)DNA的鉴定
①配制二苯胺试 剂取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混匀。
②鉴定 取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100 ℃)加热10 min 。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。
六、哪些实验需要提取DNA?
DNA测序、检测目的基因、PCR检测、RAPD分析等,都需要.
七、DNA的鉴定实验过程?
取两个试管各加入两毫升两摩尔每升的氯化钠溶液,然后一个试管加入DNA,另一个试管不加,最后两个试管分别加入适量且等量二苯胺试剂,结果只有加DNA的试管出现蓝色反应。
八、DNA亲子鉴定样本怎么提取?
常用样本的采集方法和注意事项(安康亲子鉴定中心都是可以做的):
●采集血样清洗双手,用酒精消毒后刺破指尖,在干净的纸巾或者啥不上滴3滴血,阴干后包起即可。
●采集口腔黏膜清水漱口,在口腔内腮帮两侧或舌头下面边滚动边擦拭20下左右,以同样方法擦拭三根棉签,等棉签自然阴干后,用干净的纸包起即可。注意事项:孩子太小不会漱口,可以喝几口温水代替,在饭前采集。
●采集毛发拔5根-8根头发(白发或黑发均可),根部带有毛囊(白色或黑色物质),阴干后用纸包起即可。主要事项:头发是必须要拔下来的,年龄低于3周岁的需检查是否有毛囊方可采用。
九、DNA的提取实验目的是?
主要看你的实验内容,因为涉及到的层面不一样,DNA的检测是基因水平上的,就是针对基因突变,RNA的检测是看表达水平,就是主要是由于蛋白的表达异常,所以要看RNA,通常叫转录组实验
十、为什么在DNA的粗提取与鉴定中,酒精必须要?
用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶, 乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。
DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。 因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。
但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大, 尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵, 最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。
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