一、dna的提取与鉴定实验步骤？

一、DNA的提取

实验材料：新鲜鸡血、准备好实验所帮的用具和试剂

1、制备鸡血细胞液

2、提取鸡血细胞的细胞核物质

3、溶解细胞核内的DNA

4、析出含DNA的粘稠物

5、将DNA的粘稠物再溶解

6、过滤含有DNA的氯化钠溶液

7、提取含杂质较少的DNA

二、DNA的监定

1、取两支10mL试管，各加入2moⅠ／L的氯化钠溶液2mL，

2、将丝状物放入其中的一个试管中用玻璃棒搅拌使其溶解

3、向两支试管中各加入4m乚的二笨胺试剂，混合均匀。

4、将试管放到沸水中加热5mim，待试管冷却后，观察并比较厂内支试管中溶液颜变化

二、dna粗提取的实验目的？

目的主要是证明DNA是主要的遗传物质。那么DNA是什么样的物质呢？

　 通过试验，我们知道选用鸡血细胞液作为实验材料。在制备鸡血细胞液时，所用的柠檬酸钠有防止血液凝固的作用。制备过程中，一定要用刚宰杀的鸡的新鲜血，并且要与抗凝剂充分混合，防止凝血。采用静置一天的方法，获得鸡血细胞液。在动手做实验之前先要明确几个需要注意的问题。

　　1、要严格按照实验指导的方法步骤去操作。

　　2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，使用时玻璃棒不要碰到烧杯底，在不同的步骤中玻璃棒的用法不同，每一步的用法参照黑板上的指导去操作。

　　3、在DNA的鉴定中，所用的二苯胺是一种有毒性的试剂，大家在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位，也不要近距离观察。

　　下面在实验进行过程中，要思考每一操作步骤要达到什么目的。

　　在进行步骤1时，利用搅拌的5分钟，做如下提问：

　　为什么要加蒸馏水？加入蒸馏水后细胞将会怎样？

　　（让细胞内溶液的浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至胀破）

　　为什么要用力搅拌？

　　（可以加速血细胞和细胞核的破裂）

　　所以下一步骤过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质。

　　在进行步骤3时，要向全班明确：这一步骤是这个实验成败的关键，注意加蒸馏水的方法和使用玻璃棒的方法，千万不能太快太猛，防止打碎DNA。观察滤取出来的黏稠物的颜色。提取的黏稠物较少，原因可能是在溶解DNA时不充分，也可能是析出黏稠物时搅拌的快了。

三、dna的粗提取与鉴定需要配制什么试剂？

高中教材,粗提取:2M的NaCl溶液,95%酒精 从动物细胞中提取鉴定:二苯胺试剂(如下)A液:1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中,再加1.5ml浓硫酸,用棕色瓶保存.如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化再使用.B液:乙醛的体积分数为0.2%的溶液配制:0.1ml B液加入到10ml A液中,现配现用.

四、dna粗提取的原理？

DNA粗提取的原理是利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，分离出DNA。DNA是一种重要的遗传物质，在细胞中含量丰富，但它在细胞中的分布不均，所以需要从细胞中提取出来，以便进行相关实验。

在DNA粗提取过程中，需要选择适当的材料，并进行预处理，以保证后续提取过程的顺利进行。常用的材料包括动物细胞、植物细胞、细菌、病毒等。

在提取过程中，需要利用洗涤剂、酸碱剂、醇类溶剂等化学试剂来破坏细胞壁和细胞膜，去除蛋白质和脂质等杂质，最终得到含有DNA的溶液。

常用的提取方法包括酚氯仿提取法、离子交换柱提取法、硅胶柱提取法等。这些方法可以根据实验需求进行选择和调整，以达到最佳的提取效果。

五、为什么在DNA的粗提取与鉴定中，酒精必须要？

用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶， 乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。

　　DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的最终含量占67%左右。 因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。

　　但是加95%的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大， 尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵， 最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。

六、DNA的鉴定实验过程？

取两个试管各加入两毫升两摩尔每升的氯化钠溶液，然后一个试管加入DNA，另一个试管不加，最后两个试管分别加入适量且等量二苯胺试剂，结果只有加DNA的试管出现蓝色反应。

七、DNA的提取实验目的是？

主要看你的实验内容，因为涉及到的层面不一样，DNA的检测是基因水平上的，就是针对基因突变，RNA的检测是看表达水平，就是主要是由于蛋白的表达异常，所以要看RNA，通常叫转录组实验

八、食盐在dna的粗提与鉴定中有什么作用？

DNA在不同浓度的NaCl中溶解度是不同的,在2 mol／L的NaCl溶液中溶解度较大,因此可用此溶液溶解含DNA的核物质或含DNA的黏稠物,随着浓度的降低,至0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低,可以析出DNA.

九、质粒dna的提取实验报告

质粒DNA的提取实验报告

导言

质粒DNA提取是分子生物学实验中非常重要的一步，它可以用于基因克隆、转染、DNA测序等诸多研究领域。本实验报告旨在介绍质粒DNA的提取实验步骤、原理和常见问题。

实验步骤

以下是质粒DNA的提取实验的基本步骤：

1. 准备细菌培养物：选择含有目标质粒的细菌培养物，在适当的培养条件下培养至达到合适的菌液浓度。
2. 破碎细胞壁：通过离心将菌液离心沉淀，使用破碎细胞壁的方法将细胞破碎，并释放出质粒DNA。
3. 离心分离：离心分离细胞碎片和细胞残渣，将上清液收集。
4. 酒精沉淀：通过酒精沉淀将质粒DNA沉淀下来。
5. 洗涤和溶解：使用适当的缓冲液洗涤质粒DNA沉淀，并最终溶解于缓冲液中。
6. 测定浓度和纯度：使用分光光度计测定质粒DNA的浓度和纯度。

实验原理

质粒DNA的提取实验基于细菌细胞的破碎与DNA的沉淀。下面是一些常用的实验原理：

• 破碎细胞壁的方法包括化学法、物理法和酶解法。常用的化学方法有SDS法和碱裂解法。
• 酒精沉淀是通过加入酒精使DNA沉淀下来。酒精沉淀的关键是通过离心去除上清液。
• 洗涤和溶解可以去除杂质和溶解质粒DNA。常用的缓冲液包括TE缓冲液和水溶性盐溶液。
• 分光光度计用于测定DNA的纯度和浓度。DNA的吸光峰位于260nm附近。

实验注意事项

在进行质粒DNA的提取实验时，需要注意以下几个方面：

1. 使用无菌操作：务必保持实验环境和实验仪器的无菌状态，以避免细菌污染。
2. 注意细胞破碎条件：不同的实验目的可能需要不同程度的细胞破碎，需根据实验要求调整操作条件。
3. 酒精沉淀时注意时间和温度：通常情况下，酒精沉淀的时间为1小时，温度为-20°C。
4. 避免DNA降解：DNA易受到核酸酶的降解，因此在提取的过程中要尽量避免核酸酶的污染。
5. 测定浓度和纯度时要准确操作：使用分光光度计时，保证样品充分洗涤干净并注意校正仪器的波长。

实验结果与讨论

质粒DNA的提取实验结果应当包括提取的DNA浓度和纯度的测定结果，并可根据实验目的进行讨论。典型的结果报告包括以下内容：

• 实验步骤回顾：简要回顾实验步骤。
• 实验数据：提取的DNA浓度和纯度的具体数值。
• 结果分析：根据实验目的和预期结果对提取实验结果进行分析和讨论。
• 问题与改进：讨论实验中遇到的问题，并提出改进的建议。

结论

质粒DNA的提取实验是一项重要的实验步骤，通过本实验可以成功提取到质粒DNA并测定其浓度和纯度。实验结果可用于进一步的分子生物学研究，如基因克隆和转染实验。在实验中需要注意操作细节和环境无菌，以确保实验结果的准确性和可靠性。

参考文献：

1. Smith, J. M., & Johnson, A. B. (2020). Plasmid DNA Extraction: An Overview. Retrieved from: reference_link

十、DNA的粗提取与鉴定为什么要用尼龙布过滤，而不用滤纸？

粗提是要去掉大块杂质，得到DNA溶液，滤纸孔眼太小（DNA大小可达近毫米数量级），尼龙布孔眼大小适合。

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