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DNA提取方法?

一、DNA提取方法?

DNA的提取方法

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一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb

二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

四.异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)

五.表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。

六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。

七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。

二、DNA怎么提取?

DNA提取的几种方法

(1).浓盐法

利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.

也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.

两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.

以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

(2).阴离子去污剂法:

用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.

(3).苯酚抽提法:

苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

( 4).水抽提法:

利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

三、怎样提取DNA?

DNA提取是从细胞中分离和纯化DNA的过程。下面是一种常见的基本方法。

实验步骤:

1. 从含有DNA的样本(比如血液、细菌、植物等)中采集细胞并将其释放到一个离心管中。

2. 加入细胞裂解液,用来破坏细胞壁和细胞膜,释放出细胞内的DNA。

3. 加入蛋白酶,将细胞内的蛋白质降解掉。通常使用丝氨酸蛋白酶或蛋白酶K。

4. 加入盐,使得DNA与其他细胞成分分离。盐可以使DNA形成一个粘稠的团块,从而方便分离和纯化。

5. 加入冷酒精,使得DNA在酒精中沉淀并凝聚成片。通常使用70%的乙醇或异丙醇。

6. 使用微量孔径滤器或离心机进行分离和纯化,去除其它杂质,使DNA得以分离和纯化。

注意事项:

1. 在实验中使用的工具和材料要彻底消毒,以避免细菌和其他污染物的干扰。

2. 在实验过程中要保持样品温度低,以防止DNA分解。

3. 在实验过程中,不能使用过多的酒精或其他重质组分,否则DNA可能会被破坏。

四、在音频提取器中怎么提取音频?

1、首先在迅捷视频官网中下载一款可以把视频从音频中提取出来的软件音频提取器,也就是迅捷音频转换器。软件下载之后点击选择D盘为安装音频提取器的保存目录,然后再进行在线安装软件到电脑上。安装完成后点击立即体验进入。

立即下载

2、打开软件后,选择第三个功能音频提取,软件默认使用音频转换。然后就是打开准备提取视频中的音频文件。点击添加文件或者点击添加文件夹按钮把桌面上的视频文件导入到软件当中。也可以把视频拖拽到软件中。

3、然后就是设置输出文件的参数了。在软件右侧设置输出音频的片段名称以及需要提取的音频文件的片段范围。直接手动输出数字即可,然后在中间的预览框中预览所设置的视频文件,确定没有问题,那么可以确认并添加到输出列表。

4、然后就是设置输出音频文件的保存路径了。因为初次使用软件会默认保存输出在C:/Users/Pictures中。所以点击软件下方的更改路径按钮,然后再在选择框中找出一个地址保存,然后点击选择文件夹即可完成。

5、最后就是开始提取视频中的音频文件了。点击软件右下角的开始提取按钮,然后再等待软件把视频中的音频提取完毕至100%,然后就可以在保存音频文件的位置查看了。点击文件后面的打开或者下方的打开文件夹即可查看。

五、怎么把音频文案提取出来?

方法一:借助第三方工具来提取音频中的文字

推荐工具①:万能文字识别软件端口:手机端、电脑端万能文字识别是一款功能丰富的识别转换工具,它里面的“音视频转文字”,不仅可以帮我们将音频转换成文字,还能将视频转换成文字。而且它不仅支持的格式多样,转换的速度还很快,3分钟不到即可转换一个大文件;文字转换准确率高达96.5%,提取出来的内容基本不用怎么修改。

具体操作如下:

步骤一:在手机上打开该软件,点击下方工具栏“百宝箱”,进入该界面,再点击“音视频转文字”功能。

步骤二:进入“音视频转文字”功能编辑界面后,再点击“上传音频”按钮,将需要处理的音频文件添加进来。只需稍等一会,软件便会自动将音频里的文字提取出来。

六、dna的提取方法?

DNA的提取方法有7种:酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻璃棒缠绕法、异丙醇沉淀法、表面活性剂快速制备法、加热法快速制备、碱变性快速制备。

DNA的提取原则

1、保证核酸一级结构的完整性;

2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;

3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;

4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。

七、提取dna的材料?

原则上来说,凡是含有DNA的生物 材料都可以考虑。哺乳动物的血液不能 够作为提取DNA的材料,因为哺乳动物 的成熟的红细胞没有细胞核,不含有 DNA。我们在实验中,一般要选用DNA 含量相对较高的生物组织,这样成功的 可能性更大。例如,鸡血就常用作提取 DNA的材料,因为鸡血细胞核DNA含 量丰富而且容易得到

八、病毒DNA提取技巧?

以下是从动物病毒中快速提取DNA的方法,请参考该方案采用离心操作,适合于从动物组织样品中快速提取病毒基因组DNA。以下步骤都在室温下进行。

1.取50-100mg的动物组织加入约3倍体积的生理盐水进行匀浆,充分匀浆后10,000rpm离心2min去除残余组织。

2.取150μl上清液至新的洁净离心管中。

3.加入500μlDNA提取液至上清液中,颠倒混匀,室温静置5-10min裂解病毒。

4.把DNA吸附柱装在2ml收集管中,把裂解后的液体全部转移至DNA吸附柱中,10,000rpm离心1min。

5.倒弃滤液,把DNA吸附柱装回收集管中,加入400μl洗涤液至DNA吸附柱中,10,000rpm离心1min。注:洗涤液初次使用前请先加入48ml无水乙醇。使用完立即盖上盖,以防乙醇挥发。

6.重复步骤5。

7.倒弃收集管中的滤液,把DNA吸附柱装回收集管中,10,000rpm离心3min。

8.把DNA吸附柱装在新的洁净离心管中,加入30-50μl洗脱液至吸附柱中央,静置1-2min,10,000rpm离心1min,所得即为DNA溶液,可用于后续实验,若暂时不用,应于-20℃可储存。

九、植物DNA提取原理?

植物DNA的提取

1、目的要求

学习从新鲜的叶片中提取植物总DNA的方法。

2、实验原理

本实验介绍的就是一种快速简便提取植物总DNA的方法:先将新鲜的叶片在液氨中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵(简称CBA,是一种阳离子去污剂)分离缓冲液,使细胞膜破裂,同时将核酸与植物多糖等杂质分开。再经氯仿-异戊醇提取去除蛋白,即可得到适合于酶切的DNA。

3、试剂和器材

一、试剂

CTBA抽提缓冲液:2%CTBA.100mmolL Tris-HCl,pH8.0;20mmolL EDTA;1.4molL

NaCl;0.2%(vv)巯基乙醇共100mL:称取2 g CTBA,8.18 g NaCI,0.74 g EDTA Na22H20,加入10mL1molL的Tris-HCl,pH8.0,0.2mL的巯基乙醇,加水定容至100mL.

TE:TrisEDTA缓冲液:10mmolL Tris-HCl,pH8.0;1mmolL EDTA。

异丙醇:乙醇:氯仿一异戊醇(24:1,V:V):液氮。

二、材料

新鲜植物叶片。

三、材

研钵:离心机:恒温水浴。

4、操作方法

1.称取lg新鲜叶片,置于预冷的研钵中,倒入液氮,将叶片研至粉末。

2.将叶片粉末转入一个30mL离心管中。

3。加10 mL CTBA抽提缓冲液,轻轻转动离心管使之混匀。于65℃温育10min。加入等体积的氯仿一异戊醇,轻轻颠倒混匀。

4.室温下4000rmin离心10min,回收上层水相。在回收的上层水相中。

5。加入23体积预冷的异丙醇(预冷至一20℃),轻轻混匀,置冰箱中放置数小时梦至过夜,使核酸沉淀下来。

6.室温下4000rmin离心10min。

7.小心倒去上清液,用80%乙醇洗涤沉淀物.尽量沥干乙醇,置于真空干燥器内干称重,计算产率。

8.将DNA沉淀溶于1mLTE中。

十、如何提取音频?

音频提取方法:

①首先将视频保存到手机上,打开这款工具,在首页找到【音频提取】功能;

②随后进入手机相册,找到保存的视频,进行勾选,再点击【下一步】;

③等待片刻,就能将视频里的音频分离出来了,处理速度非常快,点击播放试听;

④提取出来的音频还能继续编辑,比如音频裁剪、音频合并、格式转换、声道转换;

⑤接下来返回到首页,点击底部的【文件库】,就能找到音频文件了;

⑥最后播放音频,左下角有个“铃铛”按钮,可以快速设置为手机铃声、通知铃声、闹钟铃声。

电脑提取方法:

①如果你经常用电脑,可以使用【迅捷音频转换器】,重点是支持批量处理,打开后在顶部找到【音频提取】功能;

②先添加音频文件,还支持裁剪音频范围,接着添加到下方输出文件列表里,最后点击【提取】按钮,就能将视频里的声音分离出来。

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这篇关于《DNA提取方法?》的文章就介绍到这了,更多新媒体运营相关内容请浏览A5工具以前的文章或继续浏览下面的相关文章,望大家以后多多支持A5工具 - 全媒体工具网

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